Mac-2BP Double Nickaseプラスミド (h): sc-403108-NIC

LGALS3BP は Mac-2BP（ガレクチン3結合タンパク質）をコードしており、Mac-2BP は分泌され、細胞外マトリックス（ECM）にも関連する糖タンパク質である。ガレクチンやインテグリンなどの結合パートナーを介して細胞間相互作用および細胞−ECM 相互作用を調節する。Mac-2BP は接着、遊走、免疫調節、ならびに細胞外環境のリモデリングに関与し、その下流で炎症シグナル伝達や腫瘍−間質間コミュニケーションに影響を及ぼす。LGALS3BP の発現変化は、複数のがんや線維化／炎症の文脈で報告されており、疾患関連セクレトームのバイオマーカー候補成分として評価されることが多い。これらの特性により、LGALS3BP はヒト細胞モデルにおいて、微小環境による制御、免疫−上皮クロストーク、ならびに転移関連経路を研究するための有用な標的となる。

Mac-2BP ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における LGALS3BP 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、LGALS3BP内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、LGALS3BPの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、LGALS3BPが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。