LTBP-3CRISPR激活质粒(h): sc-404036-ACT
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- LTBP-3 CRISPER激活质粒（h）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
- LTBP-3 CRISPR 激活质粒 (h)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
- 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募
- 由 LTBP-3 CRISPR 激活质粒 (h) 和 LTBP-3 CRISPR 激活质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别针对 LTBP3 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：LTBP-3: sc-390913，通过WB, IF或者IHC分析
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LTBP-3CRISPR激活质粒(h) | sc-404036-ACT | 20 µg | $397.00 |
LTBP3 编码潜在型转化生长因子 β 结合蛋白 3（LTBP-3），这是一种细胞外基质（ECM）糖蛋白，可与潜在型 TGF-β 复合物结合，并帮助调控其在组织中的隔离、储存及空间性激活。通过调节 TGF-β 的生物可利用性，LTBP-3 参与 SMAD 依赖性信号传导以及细胞外基质重塑过程，从而影响细胞黏附、迁移、分化和组织稳态。LTBP3 表达或功能的改变与 TGF-β 信号失衡有关，涉及纤维化、结缔组织重塑以及肿瘤微环境生物学等情境，因此对开展基质依赖性信号机制研究具有重要意义。研究人员常在连接 ECM 组织与生长因子激活及其下游转录程序的通路中检测 LTBP-3 的作用。
LTBP-3 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性LTBP3的表达。
LTBP-3 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的LTBP3基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于LTBP3转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性LTBP-3表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的LTBP3位点，并能够研究内源性位点上依赖于LTBP-3的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在LTBP3表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟LTBP-3通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。