LSECtin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404538

개요

CLEC4G는 간굴모양혈관 내피세포(liver sinusoidal endothelial cell, LSEC)에서 주로 발현되는 C-형 렉틴 수용체인 LSECtin을 암호화하며, 혈중을 순환하는 당단백질과 일부 병원체에 존재하는 특정 당사슬(glycan) 모티프에 결합합니다. LSECtin은 탄수화물 인식에 의존하는 상호작용을 통해 간의 면역 감시, 세포–세포 접착, 그리고 간 미세환경에서의 백혈구 이동(유주) 조절에 기여합니다. 보고된 신호전달 교차(crosstalk)에는 항원 포획 및 처리 경로의 조절과, 관용성(tolerogenic) 대 염증성 반응을 형성하는 다른 렉틴·스캐빈저 수용체 네트워크와의 협조가 포함됩니다. CLEC4G/LSECtin 발현의 이상 조절은 종양–간 상호작용 변화 및 면역 회피 표현형과 연관되어 왔으며, 이는 간 염증, 감염 생물학, 전이 관련 과정 연구에서 기전적 핵심 노드로 활용될 수 있음을 시사합니다.

LSECtin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CLEC4G 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CLEC4G 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CLEC4G의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 LSECtin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 LSECtin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CLEC4G 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• LSECtin 기능에 중요한 CLEC4G 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CLEC4G 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• LSECtin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 LSECtin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CLEC4G 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  LSECtin HDR 플라스미드 (h) 및 LSECtin HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CLEC4G 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CLEC4G 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.