LRP4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401708

概要

LRP4（low-density lipoprotein receptor–related protein 4）は、LDL受容体ファミリーに属する一回膜貫通型受容体で、細胞表面において共受容体およびシグナル伝達の足場（スキャフォールド）として機能します。特に、アグリン–LRP4–MuSKシグナル伝達を介して神経筋シナプスの形成を制御し、アセチルコリン受容体のクラスター形成とシナプス成熟を協調させることでよく知られています。さらにLRP4は、細胞外リガンドに結合し、膜上での経路利用可能性に影響を与えることで、Wnt/β-カテニン経路やBMP関連シグナルの出力も調節します。LRP4の遺伝学的変化や自己免疫性の異常は、神経筋接合部疾患や骨格表現型と関連しており、受容体輸送、シナプス構築、組織パターニングにおける重要性を裏付けています。

LRP4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるLRP4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、LRP4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、LRP4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、LRP4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、LRP4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、LRP4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• LRP4の機能に不可欠なLRP4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、LRP4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• LRP4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびLRP4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、LRP4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  LRP4 HDRプラスミド（h）および LRP4 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはLRP4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のLRP4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。