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LRP慢病毒激活颗粒(m2) | sc-429657-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
小鼠Mvp基因编码主要穹窿蛋白(major vault protein,MVP,也称LRP),它是穹窿核糖核蛋白颗粒的关键结构组分;该颗粒被认为参与核质转运、细胞内运输以及信号转导调控。MVP参与细胞应激反应,并可在不同情境下调节包括PI3K–AKT和MAPK在内的信号通路,从而影响细胞增殖、凋亡及炎症反应输出。MVP表达异常与多药耐药表型和肿瘤生物学相关,同时也被用于研究免疫调控与神经炎症过程。在小鼠模型中对Mvp进行基因编辑,可用于机制性解析穹窿颗粒的功能,探究应激或外源化合物暴露条件下的通路串扰,并开展功能基因组学研究,以阐明MVP与疾病相关细胞表型之间的联系。
LRP 慢病毒激活颗粒(m2)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Mvp 表达。
LRP 慢病毒激活颗粒(m2)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Mvp转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性LRP表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Mvp 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。