LPAAT-η Plasmide Double Nickase (h): sc-406893-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LPAAT-η Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il LPAAT-η Double Nickase Plasmid (h) e il LPAAT-η Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira LPCAT4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LPAAT-η Plasmide Double Nickase (h) | sc-406893-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LPAAT-η Plasmide Double Nickase (h2) | sc-406893-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LPCAT4 codifica la lisofosfatidilcolina aciltransferasi 4 (LPAAT-η), un enzima associato al reticolo endoplasmatico che rimodella i fosfolipidi di membrana acilando i lisofosfolipidi per generare fosfatidilcolina e glicerofosfolipidi correlati. Attraverso questa attività del ciclo di Lands, LPAAT-η influenza la composizione e la curvatura delle membrane e l’omeostasi degli organelli, con effetti a valle sul traffico vescicolare, sulla dinamica delle goccioline lipidiche e sulla segnalazione responsiva allo stress. L’alterazione del rimodellamento dei fosfolipidi e dell’attività aciltransferasica è stata collegata a cambiamenti nella segnalazione proliferativa e infiammatoria e a una disregolazione metabolica, rendendo LPCAT4 un nodo rilevante per studi che connettono il metabolismo lipidico a fenotipi cellulari associati a malattia.
LPAAT-η Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus LPCAT4 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di LPCAT4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di LPCAT4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con LPCAT4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.