LMO2 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421447-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LMO2O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LMO2 (m) e o Plasmídeo Double Nickase LMO2 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Lmo2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LMO2 Anticorpo (1A9-1): sc-65736
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LMO2 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421447-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LMO2 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-421447-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Lmo2 codifica a proteína LMO2, que contém apenas domínios LIM, um adaptador nuclear que monta complexos transcricionais multiproteicos que controlam decisões de destino celular. Na hematopoiese murina, a LMO2 participa de redes regulatórias com fatores como TAL1/SCL, proteínas GATA e LDB1 para coordenar programas de expressão gênica que sustentam a manutenção de células-tronco e progenitoras, a diferenciação eritroide e o desenvolvimento vascular. O circuito transcricional associado à LMO2 se cruza com processos mais amplos de cromatina e de especificação de linhagens, que influenciam a dinâmica de proliferação e diferenciação. A expressão desregulada de Lmo2 ou a composição alterada desses complexos é amplamente usada como modelo para estudar mecanismos de reprogramação transcricional leucemogênica e aspectos relacionados da biologia de doenças hematológicas in vivo e em células cultivadas.
LMO2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Lmo2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Lmo2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Lmo2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Lmo2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.