Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Leukocyte-type 12-LO Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419089-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Leukocyte-type 12-LOO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Leukocyte-type 12-LO (m) e o Plasmídeo Double Nickase Leukocyte-type 12-LO (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Alox15. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:15-LO Anticorpo (B-7): sc-133085
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Leukocyte-type 12-LO Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419089-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Leukocyte-type 12-LO Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419089-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Alox15 de camundongo codifica a 12-lipoxigenase do tipo leucocitário (12-LO), uma dioxigenase de ferro não heme que oxigena ácidos graxos poli-insaturados, como o ácido araquidônico, gerando mediadores lipídicos bioativos, incluindo o 12-HETE e oxilipinas relacionadas. Esses produtos participam de sinalização sensível ao estado redox, regulação de respostas inflamatórias, quimiotaxia de leucócitos e remodelamento lipídico, conectando a atividade de Alox15 ao metabolismo de eicosanoides e a programas de resolução. Em contextos de células imunes e vasculares, metabólitos derivados da 12-LO podem influenciar a sinalização de citocinas, o estresse oxidativo e decisões de destino celular que moldam a inflamação tecidual. Consequentemente, Alox15 é amplamente estudado em modelos de inflamação, aterosclerose, disfunção metabólica e lesão tecidual imunomediada, nos quais o balanço de mediadores lipídicos é um determinante-chave do fenótipo.
Leukocyte-type 12-LO O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Alox15 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Alox15. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Alox15. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Alox15 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.