Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LETM1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406163
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LETM1 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico LETM1, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: LETM1 Antibody (D-5): sc-271235
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LETM1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-406163 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
LETM1 (leucine zipper EF-hand containing transmembrane protein 1) è una proteina della membrana interna mitocondriale implicata nell’omeostasi ionica mitocondriale e nel controllo bioenergetico. Contribuisce alla regolazione della morfologia mitocondriale, dell’organizzazione delle creste e dell’accoppiamento del trasporto ionico alla fosforilazione ossidativa, collegando l’attività di LETM1 al metabolismo energetico cellulare e alle risposte allo stress. Un’alterazione del dosaggio di LETM1 è stata associata a fenotipi di neurosviluppo e a disfunzione mitocondriale, e la sua deregolazione è stata studiata nel contesto del metabolismo e della proliferazione delle cellule tumorali. In quanto regolatore mitocondriale, LETM1 è spesso oggetto di studio per il suo impatto sulla sensibilità all’apoptosi, sulla segnalazione delle specie reattive dell’ossigeno e sul rimodellamento delle vie metaboliche.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO LETM1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene LETM1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del LETM1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto LETM1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina LETM1.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di LETM1 per lo studio della segnalazione di LETM1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni LETM1 critici per la funzione di LETM1
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di LETM1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal LETM1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal LETM1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus LETM1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal LETM1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR LETM1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia LETM1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio LETM1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.