Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LETM1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406163
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- LETM1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico LETM1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: LETM1 Anticuerpo (D-5): sc-271235
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
LETM1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406163 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
LETM1 (proteína transmembrana 1 que contiene un motivo “leucine zipper” y un dominio EF-hand) es una proteína de la membrana interna mitocondrial implicada en la homeostasis iónica mitocondrial y en el control bioenergético. Contribuye a la regulación de la morfología mitocondrial, la organización de las crestas y el acoplamiento del transporte de iones con la fosforilación oxidativa, vinculando la actividad de LETM1 al metabolismo energético celular y a las respuestas al estrés. Se ha asociado una dosis alterada de LETM1 con fenotipos del neurodesarrollo y disfunción mitocondrial, y su desregulación se ha explorado en el contexto del metabolismo y la proliferación de células tumorales. Como regulador mitocondrial, LETM1 se estudia con frecuencia por su impacto en la sensibilidad a la apoptosis, la señalización de especies reactivas de oxígeno y la remodelación de vías metabólicas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO LETM1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen LETM1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del LETM1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de LETM1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína LETM1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en LETM1 para la investigación de la señalización de LETM1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de LETM1 críticos para la función de LETM1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de LETM1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido LETM1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido LETM1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus LETM1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR LETM1 (h) y el plásmido HDR LETM1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología LETM1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana LETM1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.