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LETM1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-406163 | 20 µg | $397.00 |
LETM1 (leucine zipper EF-hand containing transmembrane protein 1) è una proteina della membrana interna mitocondriale implicata nell’omeostasi ionica mitocondriale e nel controllo bioenergetico. Contribuisce alla regolazione della morfologia mitocondriale, dell’organizzazione delle creste e dell’accoppiamento del trasporto ionico alla fosforilazione ossidativa, collegando l’attività di LETM1 al metabolismo energetico cellulare e alle risposte allo stress. Un’alterazione del dosaggio di LETM1 è stata associata a fenotipi di neurosviluppo e a disfunzione mitocondriale, e la sua deregolazione è stata studiata nel contesto del metabolismo e della proliferazione delle cellule tumorali. In quanto regolatore mitocondriale, LETM1 è spesso oggetto di studio per il suo impatto sulla sensibilità all’apoptosi, sulla segnalazione delle specie reattive dell’ossigeno e sul rimodellamento delle vie metaboliche.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO LETM1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene LETM1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del LETM1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto LETM1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina LETM1.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di LETM1 per lo studio della segnalazione di LETM1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
CRISPR +/- HDR
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.