Latrophilin-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-411703

概要

ADGRL3は、神経系に豊富に発現する接着型Gタンパク質共役受容体（GPCR）であるラトロフィリン3をコードしており、細胞間接触部位で機能してシナプス形成、神経突起の伸長、神経回路の組み立てを制御します。ラトロフィリン3は、細胞外の接着ドメインとGPCRとしてのシグナル伝達能を介して、細胞外リガンドを細胞内経路へと結び付け、細胞骨格の再編成、小胞輸送、神経細胞間結合性に影響を与えます。遺伝学的研究および機能解析から、ADGRL3が神経発達および神経精神疾患関連の表現型に関与することが示唆されており、シナプスの組織化やネットワークレベルのシグナル伝達を解明するための分子学的な手掛かりとして有用であることが支持されています。したがって、ADGRL3を実験的に解析することは、接着型GPCRシグナルが神経細胞の分化、興奮性、シナプス維持にどのように寄与するかを理解するうえで重要です。

Latrophilin-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるADGRL3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ADGRL3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ADGRL3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Latrophilin-3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Latrophilin-3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ADGRL3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Latrophilin-3の機能に不可欠なADGRL3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ADGRL3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Latrophilin-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびLatrophilin-3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ADGRL3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Latrophilin-3 HDRプラスミド（h）および Latrophilin-3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはADGRL3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のADGRL3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。