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LAIR-1双切口酶质粒(h) | sc-403542-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LAIR-1双切口酶质粒(h2) | sc-403542-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
白细胞相关免疫球蛋白样受体 1(LAIR1)基因编码 LAIR-1,这是一种抑制性胶原受体,广泛表达于免疫细胞表面,可通过免疫受体酪氨酸抑制基序(ITIM)信号传导来减弱细胞活化。LAIR-1 与配体结合后,会招募 SHP-1/SHP-2 等磷酸酶,抵消抗原受体与细胞因子信号下游由激酶驱动的通路,从而设定细胞增殖、细胞因子产生以及细胞毒性反应的激活阈值。该类似免疫检查点的信号轴还会影响在富含胶原的微环境中白细胞的黏附与迁移,并调节先天与适应性免疫之间的串扰。LAIR-1 活性失衡与免疫稳态改变及炎症表型相关,因此常在自身免疫、感染以及肿瘤—免疫相互作用等研究背景中被重点关注。
LAIR-1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 LAIR1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对LAIR1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏LAIR1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了LAIR1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。