LAIR-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403542-NIC

O receptor 1 semelhante a imunoglobulina associado a leucócitos (LAIR1) codifica o LAIR-1, um receptor inibitório de colágeno amplamente expresso em células imunes que atenua a ativação por meio da sinalização do motivo inibitório baseado em tirosina de imunorreceptores (ITIM). Após o engajamento do ligante, o LAIR-1 recruta fosfatases como SHP-1/SHP-2 para contrabalançar vias dirigidas por quinases a jusante de receptores de antígeno e da sinalização de citocinas, definindo limiares para proliferação, produção de citocinas e respostas citotóxicas. Esse eixo de sinalização, semelhante a um checkpoint, influencia a adesão e a migração de leucócitos em microambientes ricos em colágeno e modula a comunicação entre a imunidade inata e a adaptativa. A atividade desregulada do LAIR-1 tem sido associada a alterações da homeostase imune e a fenótipos inflamatórios, sendo frequentemente estudada em contextos que incluem autoimunidade, infecção e interações entre tumor e sistema imune.

LAIR-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LAIR1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LAIR1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LAIR1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LAIR1 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.