L-type Ca⁺⁺ CP α1D CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-401745

概述

CACNA1D 编码 L 型电压门控钙通道的成孔 α1D 亚基（CaV1.3）。该通道将膜去极化与 Ca2+ 内流及其下游 Ca2+ 依赖性信号传导相耦联。CaV1.3 通过塑造胞质 Ca2+ 动态来调控钙/钙调蛋白通路、激酶级联反应以及活动依赖性的基因表达程序，从而参与兴奋–转录耦联。在非兴奋性与兴奋性细胞中，CACNA1D 的活性通过调节钙稳态影响细胞分化、分泌以及电生理特性。CACNA1D 的遗传与调控改变与涉及异常电信号和 Ca2+ 依赖性转录控制的疾病相关，这也支持在与疾病相关的细胞模型中开展通道功能的机制研究。

L-type Ca++ CP α1D CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中CACNA1D基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对CACNA1D基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏CACNA1D开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使L-type Ca++ CP α1D蛋白表达失活。

该CRISPR敲除系统能够高效构建CACNA1D缺失的细胞模型，用于L-type Ca++ CP α1D信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

主要特点

• 针对对 L-type Ca++ CP α1D 功能至关重要的 CACNA1D 外显子的 sgRNA
  通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
  GFP 报告基因用于识别转染细胞
  针对多个 CACNA1D 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
  兼容转染递送

设计变体

CRISPRs +/- HDR

• 由 L-type Ca++ CP α1D CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 L-type Ca++ CP α1D CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 CACNA1D 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
  由 L-type Ca++ CP α1D HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 L-type Ca++ CP α1D HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由CACNA1D同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定CACNA1D靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。