KRTAP14 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423901

概要

Krtap14は、マウスにおいて毛幹マトリックスの構造要素である「ケラチン関連タンパク質14（keratin-associated protein 14）」をコードする遺伝子で、システインに富む小型タンパク質です。ケラチン中間径フィラメントの架橋に寄与し、毛髪の機械的強度の維持に関与します。KRTAP14は毛包ケラチノサイトの終末分化プログラムに関与し、毛髪繊維の組み立て、キューティクル／コルテックスの組織化、ならびにジスルフィド結合を介した安定化を制御する過程に組み込まれています。ケラチン関連タンパク質の発現変化や構造的変異は、毛髪の質感や脆弱性といった表現型の変化と関連することが知られており、Krtap14は毛幹の健全性と毛包生物学を研究するうえで重要な標的となります。その発現は、付属器形成を規定する角化ネットワークや、表皮分化複合体（EDC）関連経路とあわせて検討されることが多いです。

KRTAP14 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるKrtap14遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Krtap14内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Krtap14のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、KRTAP14タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、KRTAP14シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Krtap14欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• KRTAP14の機能に不可欠なKrtap14エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Krtap14ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• KRTAP14 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびKRTAP14 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Krtap14遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  KRTAP14 HDRプラスミド（m）および KRTAP14 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはKrtap14ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のKrtap14標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。