KDEL receptor 2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-426263

概要

Kdelr2 は、ゴルジ体に局在する回収受容体である KDEL 受容体2をコードしており、可溶性ER内腔タンパク質のC末端にあるKDEL様モチーフを認識し、COPI被覆小胞を介してゴルジ体から小胞体へ逆行輸送（レトログレード輸送）を仲介します。ERのプロテオスタシスと、シャペロンおよびフォールディング酵素の適切な区画化を維持することで、KDEL受容体2は分泌経路の忠実性を支え、ER品質管理に関連するストレスシグナルを抑制します。この輸送軸は、小胞体ストレス応答（UPR）の制御、糖タンパク質成熟、ならびにゴルジ体—小胞体間のリサイクリング動態と交差し、タンパク質毒性ストレスへの細胞適応に影響を与えます。ER—ゴルジ体輸送とプロテオスタシスの破綻は、神経変性、代謝異常、がん細胞における分泌機構の再構築と関連づけられており、Kdelr2は機構解明研究における有用な結節点となります。

KDEL receptor 2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるKdelr2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Kdelr2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Kdelr2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、KDEL receptor 2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、KDEL receptor 2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Kdelr2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• KDEL receptor 2の機能に不可欠なKdelr2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Kdelr2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• KDEL receptor 2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびKDEL receptor 2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Kdelr2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  KDEL receptor 2 HDRプラスミド（m）および KDEL receptor 2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはKdelr2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のKdelr2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。