JMJD5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405787-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- JMJD5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase JMJD5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase JMJD5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KDM8. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:JMJD5 Anticorpo (D-5): sc-377078
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
JMJD5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405787-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
JMJD5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405787-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KDM8 (JMJD5) codifica uma dioxigenase contendo o domínio Jumonji C que atua como regulador epigenético, conectando o estado da cromatina ao controle transcricional. O JMJD5 tem sido implicado em atividades de hidroxilação/desmetilação de substratos histônicos e não histônicos e modula processos como a progressão do ciclo celular, respostas a danos no DNA e a expressão de genes metabólicos. Por meio de interações com complexos transcricionais e associados à cromatina, o JMJD5 contribui para a regulação de vias responsivas à hipóxia e ao estresse e para a coordenação de programas proliferativos. A desregulação da atividade ou da expressão de JMJD5 tem sido associada a alterações no controle de crescimento e na manutenção do genoma, tornando o KDM8 um alvo útil para estudos mecanísticos em biologia do câncer e distúrbios relacionados.
JMJD5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KDM8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KDM8. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KDM8. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KDM8 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.