JMJD2C CRISPR Activationプラスミド (h): sc-403282-ACT

KDM4C（JMJD2C）は、Jumonji C（JmjC）ドメインを含むヒストン脱メチル化酵素をコードしており、主にH3K9me3/me2などの抑制的なメチル化マークを除去することで、クロマチンの開放と転写能の獲得を促進します。ヒストンメチル化の動的な制御を通じて、JMJD2Cは細胞周期の進行、DNA損傷応答、系譜特異的な転写ネットワークに関連する遺伝子発現プログラムのエピジェネティック制御に影響を与えます。KDM4C活性の破綻は、複数のがんで観察される異常なクロマチン状態と関連しており、エンハンサーやプロモーターのアクセス性の変化が腫瘍性（オンコジェニック）転写回路を強化し得ます。核内のクロマチン制御因子として、JMJD2Cは転写因子との協調、クロマチンリモデリング、ならびにヒト細胞におけるエピジェネティック可塑性の維持における役割でしばしば研究されています。

JMJD2C CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性KDM4Cの発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

JMJD2C CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における KDM4C 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はKDM4C転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性JMJD2Cの発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のKDM4C遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるJMJD2C依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびKDM4C発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるJMJD2C経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。