Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ITM2B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421189
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ITM2B O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ITM2B, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ITM2B Anticorpo (C-8): sc-374362
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ITM2B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421189 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Itm2b codifica a proteína integral de membrana ITM2B (também conhecida como BRI2), uma proteína transmembrana do tipo II implicada no tráfego de membranas e no processamento proteolítico nos sistemas secretório e endolisossomal. A ITM2B participa da homeostase neuronal e tem sido associada à regulação da produção de peptídeos amiloidogênicos por meio de interações que influenciam o processamento da APP. Em camundongos, a expressão de Itm2b é enriquecida no sistema nervoso e é utilizada para estudar vias que governam a manutenção sináptica, o controle de qualidade de proteínas e a função lisossomal. Alterações na biologia da ITM2B estão associadas a fenótipos relacionados à neurodegeneração e oferecem um ponto de entrada mecanístico para investigar o desequilíbrio da proteostase e a neuropatologia relacionada ao envelhecimento.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ITM2B (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Itm2b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Itm2b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Itm2b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ITM2B.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Itm2b para a investigação da sinalização de ITM2B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Itm2b críticos para a função ITM2B
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Itm2b para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ITM2B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ITM2B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Itm2b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ITM2B Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ITM2B (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Itm2b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Itm2b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.