Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ISYNA1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-404785
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ISYNA1 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico ISYNA1, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ISYNA1 Antibody (C-9): sc-271830
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ISYNA1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-404785 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
ISYNA1 (inositol-3-fosfato sintasi 1) codifica l’enzima limitante la velocità che converte il glucosio-6-fosfato in mio-inositolo-3-fosfato, fornendo un punto di ingresso fondamentale nella biosintesi de novo del mio-inositolo. Il mio-inositolo fornisce precursori per il fosfatidilinositolo e per i lipidi di segnalazione fosfoinositidici che regolano il traffico di membrana, la segnalazione associata ai recettori, la dinamica del citoscheletro e l’omeostasi del calcio intracellulare. Grazie al suo contributo al metabolismo di PI/PI(4,5)P2/PI(3,4,5)P3, ISYNA1 influenza vie come PI3K–AKT e la segnalazione guidata da PLC, che modellano proliferazione, risposte allo stress e differenziamento. Alterazioni dell’omeostasi dell’inositolo e dei fosfoinositidi sono state implicate in fenotipi metabolici e neuroevolutivi, rendendo ISYNA1 un bersaglio utile per studi meccanicistici sulla segnalazione e sulla dinamica di membrana.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ISYNA1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene ISYNA1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del ISYNA1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto ISYNA1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ISYNA1.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di ISYNA1 per lo studio della segnalazione di ISYNA1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni ISYNA1 critici per la funzione di ISYNA1
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di ISYNA1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal ISYNA1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal ISYNA1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus ISYNA1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal ISYNA1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR ISYNA1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia ISYNA1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio ISYNA1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.