Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IRP-1双切口酶质粒(h): sc-401817-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- IRP-1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- IRP-1双切酶质粒（h）和IRP-1双切酶质粒（h2）编码针对ACO1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：IRP-1: sc-166022，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
IRP-1双切口酶质粒(h) | sc-401817-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IRP-1双切口酶质粒(h2) | sc-401817-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 ACO1 基因编码铁调控蛋白 1（IRP-1）。IRP-1 是一种具有双重功能的细胞质蛋白，可在携带 [4Fe–4S] 簇的乌头酸酶（aconitase）与结合 RNA、调控铁代谢的因子之间相互转换。在缺铁或氧化应激条件下，IRP-1 会结合靶标 mRNA 上的铁响应元件（IRE），从而调控铁蛋白、转铁蛋白受体和铁输出蛋白（ferroportin）等关键铁处理基因的翻译与 mRNA 稳定性，将铁硫簇生物发生与转录后基因调控连接起来。这一开关还与细胞氧化还原稳态、线粒体代谢以及低氧适应程序相耦联，通过调节铁的可用性来满足血红素合成和 Fe–S 酶的需求。IRP-1/IRE 信号通路失调与多种情境相关并受到研究，包括贫血与铁过载、神经退行性疾病、癌细胞代谢重塑，以及炎症应激等——在这些情况下，铁稳态会影响氧化损伤程度与细胞增殖能力。
IRP-1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 ACO1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ACO1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏ACO1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了ACO1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。