Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
IRF-5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424184
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IRF-5 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IRF-5, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IRF-5 Anticorpo (10T1): sc-56714
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IRF-5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-424184 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Irf5 de camundongo codifica o fator regulador de interferon 5 (IRF-5), um fator de transcrição que integra o reconhecimento imune inato com programas gênicos inflamatórios a jusante. O IRF-5 é ativado a jusante de receptores Toll-like endossomais e da sinalização dependente de MyD88, promovendo a expressão de interferon tipo I e de redes de citocinas pró-inflamatórias por meio da regulação coordenada de genes estimulados por interferon. Em macrófagos, células dendríticas e células B, o IRF-5 contribui para a polarização e as respostas efetoras, modulando o equilíbrio de citocinas e a imunidade dirigida por antígenos. A atividade desregulada do IRF-5 tem sido associada a fenótipos autoimunes e inflamatórios, tornando o Irf5 um alvo útil para dissecar vias relevantes para a desregulação imune sistêmica em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IRF-5 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Irf5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Irf5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Irf5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IRF-5.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Irf5 para a investigação da sinalização de IRF-5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Irf5 críticos para a função IRF-5
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Irf5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IRF-5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo IRF-5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Irf5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IRF-5 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR IRF-5 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Irf5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Irf5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.