IQGAP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406335

概要

IQGAP3（IQモチーフ含有GTPase活性化タンパク質3）は、低分子量GTPase、アクチン制御因子、キナーゼカスケードを結び付けることで、シグナル伝達と細胞骨格ダイナミクスを協調させる足場（スキャフォールド）タンパク質です。細胞周期の進行、方向性のある移動、接着の再構築に関与し、MAPK/ERK経路やRhoファミリーGTPaseシグナルなどからの入力を統合して、増殖および運動性に関わるプログラムを形成します。IQGAP3の発現異常は複数の腫瘍で報告されており、増殖能の亢進、浸潤性の増大、上皮—間葉系様の性質の変化との関連から、しばしば研究対象となっています。ヒト遺伝子としてのIQGAP3は、機序解明型の疾患モデルにおいて、細胞骨格構築と分裂促進性シグナルのネットワークレベルの制御を解析するための結節点（ノード）として広く利用されています。

IQGAP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるIQGAP3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、IQGAP3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、IQGAP3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IQGAP3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IQGAP3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、IQGAP3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IQGAP3の機能に不可欠なIQGAP3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、IQGAP3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IQGAP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびIQGAP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、IQGAP3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IQGAP3 HDRプラスミド（h）および IQGAP3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIQGAP3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIQGAP3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。