Integrin α7/ITGA7 Plasmide Double Nickase (h): sc-401678-NIC

ITGA7 codifica per l’integrina α7, una subunità α legante la laminina che si associa a β1 per formare un importante recettore di adesione nel muscolo scheletrico e cardiaco. Questo eterodimero collega i segnali della matrice extracellulare al citoscheletro di actina attraverso le adesioni focali e le reti di segnalazione delle integrine, coordinando adesione cellulare, migrazione, meccanotrasduzione e stabilità delle fibre muscolari. La segnalazione dipendente dall’integrina α7 interseca vie che regolano la dinamica del citoscheletro e la sopravvivenza cellulare, incluse FAK/SRC e la modulazione a valle dell’asse MAPK/PI3K. Alterazioni dell’espressione o della funzione di ITGA7 sono state associate a fenotipi correlati alle distrofie muscolari, a una rigenerazione muscolare compromessa e a cambiamenti nei programmi di adesione e invasione delle cellule tumorali, rendendolo rilevante per studi sulla miogenesi e sul rimodellamento della matrice extracellulare.

Integrin α7/ITGA7 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ITGA7 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ITGA7. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ITGA7. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ITGA7 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.