Integrin β6/ITGB6CRISPR激活质粒(h): sc-400999-ACT

ITGB6 编码整合素 β6 亚基，可与整合素 αV 配对形成 αVβ6 异源二聚体，介导上皮细胞与细胞外基质（ECM）配体的黏附，并调控细胞迁移、极性以及组织重塑。αVβ6 可在特定情境下通过与含 RGD 基序的蛋白相互作用激活潜伏型 TGF-β，从而将 ITGB6 与 TGF-β/SMAD 信号通路、上皮–间质转化（EMT）及创伤修复程序联系起来。ITGB6 表达异常及 αVβ6 功能失调已在多种上皮来源癌症中与纤维化重塑以及肿瘤相关的侵袭和转移相关联；在这些情况下，它能够调节局部微环境与炎症信号。作为一种将 ECM 线索与细胞内信号整合的细胞表面受体，ITGB6 常用于研究力学信号转导、细胞–基质通讯以及 TGF-β 驱动的转录反应。

Integrin β6/ITGB6 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性ITGB6的表达。

Integrin β6/ITGB6 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的ITGB6基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于ITGB6转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Integrin β6/ITGB6表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的ITGB6位点，并能够研究内源性位点上依赖于Integrin β6/ITGB6的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在ITGB6表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Integrin β6/ITGB6通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。