Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Integrin α6/ITGA6/CD49f Double Nickase Plasmid (h): sc-400380-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Integrin α6/ITGA6/CD49f Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Integrin α6/ITGA6/CD49f Double-Nickase-Plasmid (h) und Integrin α6/ITGA6/CD49f Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf ITGA6 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Integrin α6/ITGA6/CD49f: sc-374057
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Integrin α6/ITGA6/CD49f Double Nickase Plasmid (h) | sc-400380-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Integrin α6/ITGA6/CD49f Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400380-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ITGA6 kodiert Integrin α6 (CD49f), eine α‑Untereinheit, die sich vorwiegend mit β1 oder β4 paart und so lamininbindende Rezeptoren bildet, die die Zell–Extrazellulärmatrix-Adhäsion vermitteln. Integrin‑α6‑Komplexe koordinieren Signalwege an fokalen Adhäsionen und Hemidesmosomen und regulieren dadurch epitheliale Polarität, Migration und Überleben über Signalachsen wie FAK/SRC, PI3K–AKT und MAPK. CD49f wird широко als Marker verwendet, der mit epithelialen Vorläuferzellen und stammzellähnlichen Kompartimenten assoziiert ist, was seine Rolle bei der Aufrechterhaltung der Gewebearchitektur und von Nischeninteraktionen widerspiegelt. Eine fehlregulierte ITGA6-Expression oder veränderte Integrin-Signalgebung wird in verschiedenen Tumorkontexten mit Invasion, metastatischer Ausbreitung und Therapie-Resistenzphänotypen in Verbindung gebracht, ebenso wie mit Basalmembran- und Hautblasen-Biologie über α6β4-abhängige Verankerungsstrukturen.
Integrin α6/ITGA6/CD49f Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des ITGA6-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von ITGA6 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die ITGA6-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit ITGA6-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.