Integrin α4/ITGA4/CD49d Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421162

Visão geral

Itga4 codifica a integrina α4 (ITGA4/CD49d), uma subunidade α que se associa às subunidades β1 ou β7 para formar as integrinas α4β1 (VLA-4) e α4β7, mediadores centrais da adesão célula–célula e célula–matriz. Esses receptores ligam-se a ligantes como VCAM1 e fibronectina, coordenando o tráfego de leucócitos, a adesão firme e a migração transendotelial durante a vigilância imunológica e a inflamação. A sinalização de ITGA4 integra-se a vias de adesão focal e de remodelamento do citoesqueleto para influenciar programas de migração, sobrevivência e ativação, além de contribuir para o posicionamento de células hematopoéticas e linfoides nos tecidos. A atividade desregulada da integrina α4 é amplamente estudada na patobiologia inflamatória e autoimune, bem como nas interações tumor–estroma que favorecem a invasão e a disseminação metastática.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Integrin α4/ITGA4/CD49d (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Itga4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Itga4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Itga4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Integrin α4/ITGA4/CD49d.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Itga4 para a investigação da sinalização de Integrin α4/ITGA4/CD49d, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Itga4 críticos para a função Integrin α4/ITGA4/CD49d
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Itga4 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Integrin α4/ITGA4/CD49d Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Integrin α4/ITGA4/CD49d Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Itga4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Integrin α4/ITGA4/CD49d Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Integrin α4/ITGA4/CD49d (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Itga4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Itga4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.