Integrin α1/ITGA1/CD49a Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-430957-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Integrin α1/ITGA1/CD49aO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Integrin α1/ITGA1/CD49a (m) e o Plasmídeo Double Nickase Integrin α1/ITGA1/CD49a (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Itga1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Integrin α1/ITGA1/CD49a Anticorpo (A-9): sc-271034
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Integrin α1/ITGA1/CD49a Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-430957-NIC | 20 µg | $410.00 |
Itga1 codifica a integrina α1 (ITGA1/CD49a), uma subunidade α que se associa à β1 para formar o recetor de colagénio/laminina α1β1, ligando a interação com a matriz extracelular à sinalização intracelular e à remodelação do citoesqueleto. A adesão mediada por ITGA1 regula a migração celular, a sobrevivência e a mecanotransdução através de complexos de adesão focal e de vias a jusante como FAK/Src, MAPK/ERK e PI3K/AKT, influenciando também a organização tecidular e as interações entre células inflamatórias e a matriz. Em modelos murinos, alterações na função de Itga1 têm sido associadas a um tráfego leucocitário desregulado, à remodelação da matriz relacionada com fibrose e a alterações dependentes do contexto na invasão de células tumorais e na biologia do estroma. Estes papéis tornam a ITGA1 um alvo útil para estudar a perceção da matriz extracelular, a retenção de células imunitárias e a sinalização induzida por colagénio em microambientes relevantes para o desenvolvimento e para a doença.
Integrin α1/ITGA1/CD49a O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Itga1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Itga1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Itga1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Itga1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.