IL-2Rα Plasmide Double Nickase (h): sc-401262-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IL-2Rα Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il IL-2Rα Double Nickase Plasmid (h) e il IL-2Rα Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira IL2RA. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: IL-2Rα Antibody (C-9): sc-393326
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IL-2Rα Plasmide Double Nickase (h) | sc-401262-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-2Rα Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401262-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IL2RA codifica la catena alfa del recettore dell’interleuchina-2 (IL-2Rα, CD25), una componente ad alta affinità del complesso recettoriale per l’IL-2 che, in associazione con IL2RB e IL2RG, media il riconoscimento dell’IL-2. L’attivazione dei recettori contenenti IL-2Rα promuove una segnalazione di STAT5 dipendente da JAK1/JAK3 e programmi trascrizionali più ampi che regolano proliferazione, sopravvivenza e differenziamento dei linfociti T, con particolare importanza per il mantenimento delle cellule T regolatorie e per l’omeostasi immunitaria. L’espressione di CD25 è regolata dinamicamente durante l’attivazione dei linfociti e contribuisce a modulare la sensibilità alle citochine all’interno dell’asse IL-2/STAT. Un’alterazione della segnalazione o dell’espressione di IL2RA è stata associata a patologie immuno-mediate e a stati funzionali modificati delle cellule T, rendendolo un bersaglio comune per studi meccanicistici in immunologia.
IL-2Rα Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus IL2RA nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di IL2RA. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di IL2RA. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con IL2RA interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.