IL-18Rβ CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421095

概要

Il18rapは、IL-18受容体付属タンパク質（IL-18Rβ）をコードしており、免疫細胞上でIL-18Rαとヘテロ二量体を形成して機能的なIL-18受容体複合体を構築するために必須の共受容体である。IL-18が結合すると、IL-18RβはMyD88および下流のIRAK/TRAF6シグナルのリクルートを助け、NF-κBおよびMAPK経路の活性化と、IFN-γなどの炎症性サイトカインの誘導を促進する。このシグナル軸はTh1分極、NK細胞のエフェクター機能、ならびに骨髄系細胞の活性化に影響し、Il18rapを自然免疫・獲得免疫応答の調節と結び付けている。IL-18/IL-18Rシグナルの異常は炎症性および自己免疫性プロセスへの関与が示唆されており、マウスにおける感染、無菌性炎症、腫瘍免疫モデルなどの文脈で頻繁に研究されている。

IL-18Rβ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIl18rap遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Il18rap内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Il18rapのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IL-18Rβタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IL-18Rβシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Il18rap欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IL-18Rβの機能に不可欠なIl18rapエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Il18rapゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IL-18Rβ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIL-18Rβ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Il18rap遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IL-18Rβ HDRプラスミド（m）および IL-18Rβ HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIl18rapホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIl18rap標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。