IL-18Rβ Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-421095

Panoramica

Il18rap codifica la proteina accessoria del recettore dell’IL-18 (IL-18Rβ), un co-recettore essenziale che eterodimerizza con IL-18Rα per formare un complesso recettoriale funzionale per l’IL-18 sulle cellule immunitarie. In seguito al legame dell’IL-18, IL-18Rβ contribuisce al reclutamento di MyD88 e della segnalazione a valle mediata da IRAK/TRAF6, promuovendo l’attivazione delle vie NF-κB e MAPK e l’induzione di citochine infiammatorie come l’IFN-γ. Questo asse influenza la polarizzazione Th1, la funzione effettrice delle cellule NK e l’attivazione mieloide, collegando Il18rap alla regolazione delle risposte immunitarie innate e adattative. Alterazioni della segnalazione IL-18/IL-18R sono state implicate in processi infiammatori e autoimmuni e vengono frequentemente studiate in modelli murini di infezione, infiammazione sterile e immunologia dei tumori.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO IL-18Rβ (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Il18rap in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Il18rap insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Il18rap a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina IL-18Rβ.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Il18rap per lo studio della segnalazione di IL-18Rβ, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Il18rap critici per la funzione di IL-18Rβ
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Il18rap per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal IL-18Rβ CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal IL-18Rβ CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Il18rap. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal IL-18Rβ Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR IL-18Rβ (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Il18rap per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Il18rap definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.