IL-12Rβ2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406442

概要

IL12RB2 は、インターロイキン12受容体β2鎖（IL-12Rβ2）をコードしており、T細胞およびNK細胞上で IL-12Rβ1 と対を成して機能的な IL-12 受容体複合体を形成するシグナル伝達サブユニットである。IL-12 が結合すると、この受容体は JAK2/TYK2 依存的な STAT4 シグナル伝達を活性化し、Th1 への分極、IFN-γ 産生、ならびに細胞性免疫を形成する細胞傷害性免疫プログラムを促進する。IL-12Rβ2 の発現量とシグナル伝達能は、炎症性および腫瘍関連の免疫微小環境における分化やエフェクター機能に影響を及ぼし、この経路が免疫調節異常や、病原体・腫瘍に対する応答の変化と結び付くことを示している。IL12RB2 活性の異常は、STAT4 によって駆動される転写ネットワークの障害を介した慢性炎症、免疫回避、感染感受性といった文脈で研究されてきた。

IL-12Rβ2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるIL12RB2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、IL12RB2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、IL12RB2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IL-12Rβ2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IL-12Rβ2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、IL12RB2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IL-12Rβ2の機能に不可欠なIL12RB2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、IL12RB2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IL-12Rβ2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびIL-12Rβ2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、IL12RB2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IL-12Rβ2 HDRプラスミド（h）および IL-12Rβ2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIL12RB2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIL12RB2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。