IGFBP5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400945-NIC

IGFBP5 (proteína 5 de ligação ao fator de crescimento semelhante à insulina) é um regulador secretado e associado à matriz extracelular da sinalização de IGF, que modula a disponibilidade de IGF-I/IGF-II e o engajamento dos receptores, influenciando assim a atividade das vias PI3K–AKT e MAPK. Além do sequestro de IGF, a IGFBP5 participa de programas de adesão, migração e sobrevivência celular por meio de interações com a matriz e de efeitos independentes de IGF dependentes do contexto. Em tecidos humanos, a expressão de IGFBP5 está ligada a processos de diferenciação e remodelamento, incluindo respostas osteogênicas e fibróticas, e é frequentemente estudada em contextos nos quais alterações na sinalização de fatores de crescimento afetam a proliferação e a dinâmica da matriz extracelular. A atividade desregulada de IGFBP5 tem sido associada ao remodelamento patológico e à biologia tumoral, tornando-a relevante para estudos mecanísticos da regulação do crescimento e da sinalização do microambiente.

IGFBP5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus IGFBP5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de IGFBP5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função IGFBP5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com IGFBP5 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.