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IFT88慢病毒激活颗粒(h) | sc-404089-LAC | 200 µl | $455.00 |
人类 IFT88 编码纤毛内运输 B(IFT-B)复合体的核心组分之一,该复合体驱动沿初级纤毛进行的顺向(向远端)运输,从而使轴丝的组装与维持得以进行,并保障纤毛信号传导正常。通过支持依赖纤毛的信号转导,IFT88 会影响刺猬(Hedgehog)通路以及其他与感觉受体偶联、且依赖完整纤毛结构与蛋白运输的过程。IFT88 的破坏或失调会扰乱纤毛发生(ciliogenesis),改变下游转录程序,并影响具纤毛细胞类型中的细胞周期与细胞极性调控。因此,IFT88 常被用于研究纤毛病(ciliopathies)、肾脏与视网膜相关表型,以及以初级纤毛功能为关键变量的发育信号缺陷。
IFT88 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 IFT88 表达。
IFT88 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在IFT88转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性IFT88表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 IFT88 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。