IFN-γRβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402794
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IFN-γRβ O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IFN-γRβ, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IFN-γRβ Anticorpo (A-11): sc-377291
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IFN-γRβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402794 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
IFNGR2 codifica a cadeia beta do recetor de interferão gama (IFN-γRβ), um correceptor essencial que se associa ao IFNGR1 para formar o complexo funcional do recetor de IFN-γ na superfície celular. Após a ligação do IFN-γ, o IFN-γRβ favorece a ativação de JAK1/JAK2 e a sinalização a jusante via STAT1, desencadeando programas transcricionais envolvidos no processamento e apresentação de antigénios, na ativação de macrófagos e na imunidade antimicrobiana. Esta via interage com redes imunitárias inatas e adaptativas mais amplas, moldando as respostas inflamatórias e a vigilância imunitária. A disrupção genética ou funcional de IFNGR2 está associada a uma resposta deficiente ao IFN-γ e a maior suscetibilidade a infeções graves, e dinâmicas de sinalização alteradas são relevantes para estudos de desregulação imunitária e de interações tumor–sistema imunitário.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IFN-γRβ (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene IFNGR2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do IFNGR2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do IFNGR2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IFN-γRβ.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de IFNGR2 para a investigação da sinalização de IFN-γRβ, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) IFNGR2 críticos para a função IFN-γRβ
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos IFNGR2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IFN-γRβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo IFN-γRβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus IFNGR2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IFN-γRβ Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR IFN-γRβ (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia IFNGR2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo IFNGR2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.