IFN-α7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421044

概要

Ifna7は、主としてウイルスや核酸を感知するシグナルに応答して産生されるI型インターフェロン・サイトカインであるマウスインターフェロンα7（IFN-α7）をコードしています。IFN-α7はIFNAR受容体複合体に結合し、JAK1/TYK2依存的にSTAT1/STAT2のリン酸化を活性化することで、ISGF3転写複合体の形成と、自然免疫および獲得免疫を形成するインターフェロン刺激遺伝子（ISG）の誘導を促進します。このシグナル軸は、TLRやRIG-I様受容体を含むパターン認識受容体経路とも交差し、抗原提示、サイトカインネットワーク、ならびに抗ウイルス制限プログラムに影響を及ぼします。I型インターフェロン活性の制御破綻は、炎症性・自己免疫性の表現型や腫瘍と免疫の相互作用にも関与することから、Ifna7はインターフェロン駆動型生物学の機序研究に有用な解析ノードとなります。

IFN-α7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIfna7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ifna7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ifna7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IFN-α7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IFN-α7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ifna7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IFN-α7の機能に不可欠なIfna7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ifna7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IFN-α7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIFN-α7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ifna7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IFN-α7 HDRプラスミド（m）および IFN-α7 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIfna7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIfna7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。