IFIT1 Plasmide Double Nickase (h): sc-403066-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IFIT1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il IFIT1 Double Nickase Plasmid (h) e il IFIT1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira IFIT1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IFIT1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403066-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IFIT1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403066-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La proteina indotta dall’interferone con ripetizioni tetratricopeptidiche 1 (IFIT1) è il prodotto di un gene stimolato dall’interferone che si lega a RNA virali e cellulari cappati e con metilazione 2′-O incompleta, per limitare la traduzione e sostenere la difesa antivirale innata. IFIT1 agisce all’interno della segnalazione dell’interferone di tipo I/III a valle dell’attivazione di JAK–STAT, cooperando con altri membri della famiglia IFIT per distinguere l’RNA self dal non-self e modulare il metabolismo dell’RNA e l’interazione con i ribosomi. Attraverso queste attività, IFIT1 contribuisce alle interazioni ospite–patogeno, alla regolazione dei programmi infiammatori e al modellamento delle risposte cellulari alle vie di sensing degli acidi nucleici. Un’espressione alterata di IFIT1 e la disregolazione delle vie dell’interferone sono frequentemente osservate in contesti di infiammazione cronica, firme interferoniche autoimmuni e rimodellamento immunitario associato alle infezioni, rendendo IFIT1 un nodo utile per studi meccanicistici.
IFIT1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus IFIT1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di IFIT1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di IFIT1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con IFIT1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.