Plasmide Double Nickase (h) IFIT1: sc-403066-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) IFIT1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IFIT1 Double Nickase (h) et le plasmide IFIT1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant IFIT1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) IFIT1 | sc-403066-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) IFIT1 | sc-403066-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La protéine induite par l’interféron contenant des répétitions tétratricopeptides 1 (IFIT1) est un produit de gène stimulé par l’interféron qui se lie à des ARN viraux et cellulaires coiffés et insuffisamment 2′-O-méthylés afin de restreindre la traduction et de soutenir la défense antivirale innée. IFIT1 agit au sein de la signalisation des interférons de type I/III en aval de l’activation JAK–STAT, en coopération avec d’autres membres de la famille IFIT, pour distinguer l’ARN du soi de celui du non-soi et moduler le métabolisme de l’ARN ainsi que l’engagement des ribosomes. Par ces activités, IFIT1 contribue aux interactions hôte–pathogène, à la régulation des programmes inflammatoires et au façonnement des réponses cellulaires aux voies de détection des acides nucléiques. Une expression altérée d’IFIT1 et une dérégulation des voies de l’interféron sont fréquemment observées dans des contextes d’inflammation chronique, de signatures d’interféron associées à l’auto-immunité et de remodelage immunitaire lié aux infections, faisant d’IFIT1 un nœud utile pour des études mécanistiques.
IFIT1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IFIT1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IFIT1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IFIT1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IFIT1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.