HtrA4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-410377-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HtrA4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HtrA4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase HtrA4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HTRA4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HtrA4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-410377-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HtrA4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-410377-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HTRA4 codifica a HtrA4, uma protease serina secretada da família HtrA que contribui para o controle de qualidade de proteínas no meio extracelular ao clivar proteínas mal dobradas ou danificadas e ao modular interações célula–matriz. Por meio da proteólise de substratos específicos, a HtrA4 pode influenciar sinalização responsiva ao estresse, cascatas inflamatórias e processos de remodelamento que moldam a homeostase tecidual. Alterações na expressão de HTRA4 foram relatadas em contextos envolvendo biologia placentária e função vascular, e a desregulação da atividade de proteases extracelulares é relevante para mecanismos de doença ligados à proteostase aberrante e ao remodelamento do microambiente. Essas características tornam a HtrA4 um alvo útil para estudar como proteases secretadas ajustam a sinalização e a dinâmica estrutural em sistemas de células humanas.
HtrA4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HTRA4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HTRA4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HTRA4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HTRA4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.