HSF2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402400-NIC

HSF2 (fator de choque térmico 2) é um fator de transcrição específico de sequência que coordena a expressão gênica responsiva ao estresse e contribui para a proteostase ao regular proteínas de choque térmico e redes de chaperonas moleculares. Além da sinalização clássica de choque térmico, o HSF2 participa de programas de desenvolvimento e diferenciação, incluindo vias neuronais e de células germinativas, e interage com o remodelamento de cromatina para moldar respostas transcricionais dependentes de estímulo. A atividade do HSF2 pode modular a progressão do ciclo celular, a suscetibilidade à apoptose e as respostas ao estresse proteotóxico, conectando-o a vias relevantes para a neurodegeneração, a biologia do câncer e distúrbios caracterizados por homeostase proteica prejudicada. Programas transcricionais dependentes de HSF2 desregulados foram relatados em múltiplos contextos relevantes para doenças, apoiando seu uso como um nó mecanístico para estudar a adaptação ao estresse e a regulação transcricional em células humanas.

HSF2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HSF2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HSF2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HSF2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HSF2 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.