Hrs Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r): sc-437306

Visão geral

Hrs (substrato de tirosina-quinase regulado pelo fator de crescimento de hepatócitos; também conhecido como HGS) é uma proteína de triagem endossomal que atua no complexo ESCRT-0 para reconhecer proteínas de membrana ubiquitinadas e direcionar seu tráfego para corpos multivesiculares, visando a degradação lisossomal. Ao coordenar a maturação endossomal e a downregulation (redução) de receptores, Hrs influencia as saídas de sinalização de receptores tirosina-quinase e de outros receptores de superfície, moldando vias que controlam proliferação, diferenciação e respostas ao estresse. Essa proteína é fundamental para a renovação de proteínas de membrana, o transporte do endossomo ao lisossomo e a proteostase — processos frequentemente investigados em estudos de neurodegeneração, inflamação e desregulação da sinalização oncogênica. Em sistemas de rato, a perturbação de Hrs subsidia pesquisas mecanísticas sobre como alterações na triagem endossomal afetam decisões de destino de receptores e a reprogramação de vias downstream.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Hrs (r) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene em linhas celulares rat. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do , juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Hrs.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de para a investigação da sinalização de Hrs, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) críticos para a função Hrs
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Hrs Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r) e pelo Hrs Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r2) têm como alvo locais distintos dentro do locus . Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Hrs Plasmídeo HDR (r) e o Plasmídeo HDR Hrs (r2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.