Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
HPRT Antibody (F-1): sc-376938. Western blot analysis of HPRT expression in Hep G2 (A), KNRK (B), HeLa (C), A-431 (D) and MCF7 (E) whole cell lysates.
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HPRT双切口酶质粒(h): sc-417332-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- HPRT 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- HPRT双切酶质粒（h）和HPRT双切酶质粒（h2）编码针对HPRT1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：HPRT: sc-376938，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
HPRT双切口酶质粒(h) | sc-417332-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HPRT双切口酶质粒(h2) | sc-417332-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HPRT1 编码次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HPRT），这是嘌呤补救途径中的关键酶，可将次黄嘌呤和鸟嘌呤回收转化为 IMP 和 GMP，从而维持核苷酸稳态并支持能量代谢。HPRT 活性参与细胞对核苷酸耗竭的应答，也是培养细胞中使用嘌呤类似物进行筛选方案的核心。HPRT1 的破坏会扰乱嘌呤代谢通量，并可升高尿酸生成，使该通路与代谢应激相关表型相联系。HPRT1 的遗传性缺陷经典上与 Lesch–Nyhan 谱系疾病相关，并且作为研究突变、选择以及 DNA 修复结果的常用模型位点。
HPRT 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 HPRT1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HPRT1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏HPRT1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了HPRT1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。