hnRNP H3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404805-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- hnRNP H3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase hnRNP H3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase hnRNP H3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HNRNPH3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:hnRNP H3 Anticorpo (D-4): sc-376416
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
hnRNP H3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404805-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
hnRNP H3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404805-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HNRNPH3 codifica a ribonucleoproteína nuclear heterogênea humana hnRNP H3, uma proteína ligante de RNA que reconhece motivos ricos em G e ajuda a coordenar decisões de splicing de pré-mRNA. A hnRNP H3 participa da regulação associada ao spliceossomo do uso alternativo de éxons, acoplando o processamento de RNA à transcrição e à maturação do mRNA. Por meio dessas funções, contribui para o controle do equilíbrio entre isoformas de transcritos, que molda vias como a regulação do ciclo celular, respostas ao estresse e o metabolismo de RNA. A atividade desregulada da família hnRNP e as perturbações em redes de splicing são frequentemente estudadas no contexto da transformação oncogênica e de mecanismos de doenças neurodegenerativas, o que torna o HNRNPH3 um alvo útil para investigar fenótipos dependentes de splicing.
hnRNP H3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HNRNPH3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HNRNPH3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HNRNPH3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HNRNPH3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.