hnRNP C1/C2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400993-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- hnRNP C1/C2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase hnRNP C1/C2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase hnRNP C1/C2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HNRNPC. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:hnRNP C1/C2 Anticorpo (4F4): sc-32308
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
hnRNP C1/C2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400993-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
hnRNP C1/C2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400993-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HNRNPC codifica a ribonucleoproteína nuclear heterogênea C1/C2 (hnRNP C1/C2), proteínas nucleares abundantes de ligação a RNA que se associam ao pré-mRNA recém-sintetizado para regular a escolha de sítios de splicing, a maturação do mRNA e a estabilidade dos transcritos. A hnRNP C1/C2 ajuda a garantir a fidelidade do processamento de RNA ao competir com a U2AF2 em tratos polipirimidínicos crípticos, limitando assim a exonização aberrante de sequências derivadas de Alu e moldando a produção de isoformas. Por meio dessas atividades, influencia programas mais amplos de expressão gênica ligados ao controle do ciclo celular, às respostas a danos no DNA e à proteostase, e é frequentemente estudada no contexto da desregulação de RNA observada em modelos de câncer e de doenças neurodegenerativas. Alterações na expressão ou na função de HNRNPC também têm sido associadas a mudanças na sinalização imune inata e em redes transcricionais adaptativas ao estresse, impulsionadas por um metabolismo de RNA desregulado.
hnRNP C1/C2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HNRNPC em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HNRNPC. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HNRNPC. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HNRNPC interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.