hnRNP A3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-418346

概要

HNRNPA3は、ヘテロ核リボヌクレオタンパク質A3（hnRNP A3）をコードしており、hnRNP A3はpre-mRNAおよび成熟転写産物に結合するRNA結合タンパク質です。これにより、選択的スプライシング、mRNAの安定性、核‐細胞質間輸送を調節します。hnRNP A3はリボヌクレオタンパク質複合体の形成にも関与し、RNAのプロセシングや翻訳に関連する遺伝子発現プログラムの協調に寄与します。hnRNPファミリーのメンバーの機能異常は、RNA代謝の変化、ストレス顆粒の動態、プロテオスタシス経路としばしば関連します。これらの過程は、転写後制御の異常や凝集しやすいRNA結合タンパク質が細胞機能障害に寄与する疾患病態において重要です。

hnRNP A3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるHNRNPA3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、HNRNPA3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、HNRNPA3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、hnRNP A3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、hnRNP A3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、HNRNPA3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• hnRNP A3の機能に不可欠なHNRNPA3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、HNRNPA3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• hnRNP A3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびhnRNP A3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、HNRNPA3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  hnRNP A3 HDRプラスミド（h）および hnRNP A3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはHNRNPA3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のHNRNPA3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。