Hmx3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420887

Visão geral

Hmx3 (proteína homeobox Hmx3) é um fator de transcrição que regula programas de expressão gênica do desenvolvimento por meio da ligação ao DNA específica de sequência e do controle de decisões de destino celular. Em camundongos, a atividade de Hmx3 está intimamente ligada à morfogênese do ouvido interno e ao padrão do neurodesenvolvimento, coordenando redes transcricionais a jusante que moldam estruturas sensoriais e a diferenciação neuronal. A interrupção de circuitos regulatórios mediados por homeobox envolvendo Hmx3 pode alterar o padrão embrionário e a organogênese, tornando-o relevante para o estudo de fenótipos congênitos do desenvolvimento e da lógica regulatória gênica da formação do sistema sensorial. Como regulador nuclear, Hmx3 é frequentemente investigado no contexto do controle transcricional, da especificação de linhagem e do cross-talk entre vias de sinalização do desenvolvimento.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Hmx3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Hmx3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Hmx3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Hmx3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Hmx3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Hmx3 para a investigação da sinalização de Hmx3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Hmx3 críticos para a função Hmx3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Hmx3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Hmx3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Hmx3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Hmx3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Hmx3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Hmx3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Hmx3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Hmx3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.