HMGI-C Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m): sc-420880-LAC

O gene **Hmga2** de camundongo codifica a proteína arquitetural de cromatina **HMGI-C**, um fator não histônico que se liga a DNA rico em AT e modula a montagem do enhanceossomo para influenciar programas transcricionais que controlam a proliferação, o comprometimento de linhagem e a temporalidade do desenvolvimento. A HMGI-C integra-se a redes de remodelamento de cromatina e de fatores de transcrição para ajustar a progressão do ciclo celular, a plasticidade epitélio–mesênquima e a autorrenovação de células-tronco/progenitoras. A expressão desregulada de **Hmga2** está associada a alterações no controle de crescimento e em estados de diferenciação, tornando-o um nó molecular amplamente utilizado para estudar a regulação gênica do desenvolvimento e a circuitaria transcricional oncogênica. Em modelos murinos, **Hmga2** atua como um regulador tratável de mudanças na arquitetura do genoma que acompanham transformação, regeneração tecidual e reprogramação celular.

As Partículas de Ativação Lentivirais HMGI-C (m) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de Hmga2 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais HMGI-C (m) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição Hmga2, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de HMGI-C. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo Hmga2 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.