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Histone Deacetylase 7 (HDAC7)CRISPR激活质粒(h) | sc-400989-ACT | 20 µg | $397.00 |
人类 HDAC7 基因编码组蛋白去乙酰化酶 7(HDAC7),属于 IIa 类 HDAC,可通过与 NCoR/SMRT 等共抑制复合物协同作用来调控染色质可及性和转录程序。HDAC7 会响应依赖磷酸化的信号在细胞核与细胞质之间穿梭,从而将激酶通路与细胞命运决定、分化以及应激反应的表观遗传调控连接起来。在免疫与血管相关情境中,研究提示 HDAC7 可通过调控转录因子与染色质状态,控制影响内皮功能和 T 细胞发育的基因网络。HDAC7 活性或表达失衡与炎症信号异常及致癌性转录程序相关,因此是研究疾病相关通路中表观遗传调控机制的有用靶点。
Histone Deacetylase 7 (HDAC7) CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性HDAC7的表达。
Histone Deacetylase 7 (HDAC7) CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的HDAC7基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于HDAC7转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Histone Deacetylase 7 (HDAC7)表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的HDAC7位点,并能够研究内源性位点上依赖于Histone Deacetylase 7 (HDAC7)的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在HDAC7表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Histone Deacetylase 7 (HDAC7)通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。