Histone Deacetylase 4 (HDAC4) Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-431586-NIC

O gene **Hdac4** em camundongos codifica a **desacetilase de histonas 4 (HDAC4)**, uma HDAC de **classe IIa** que transita entre o núcleo e o citoplasma, acoplando a fosforilação dependente de sinais à regulação da cromatina. A HDAC4 atua principalmente como **correpressores transcricional**, associando-se a fatores como **MEF2** para modular programas gênicos dependentes de acetilação que controlam a **miogênese**, a **transcrição regulada pela atividade neuronal** e o **desenvolvimento esquelético**. Sua localização e atividade integram sinalização por **quinases dependentes de Ca2+/calmodulina** e por **14-3-3**, conectando estímulos extracelulares ao controle epigenético da diferenciação e das respostas ao estresse. Redes transcricionais dependentes de HDAC4 desreguladas têm sido implicadas em fenótipos **neurodesenvolvimentais** e **neurodegenerativos**, no **remodelamento cardíaco** e em **patologias musculares** em modelos murinos, sustentando seu uso como um nó mecanístico em estudos de cromatina e sinalização.

Histone Deacetylase 4 (HDAC4) O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Hdac4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Hdac4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Hdac4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Hdac4 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.