Histone cluster 1 H1E Plasmide Double Nickase (h): sc-402775-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Histone cluster 1 H1E Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Histone cluster 1 H1E Double Nickase Plasmid (h) e il Histone cluster 1 H1E Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HIST1H1E. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Histone cluster 1 H1E Plasmide Double Nickase (h) | sc-402775-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Histone cluster 1 H1E Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402775-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HIST1H1E codifica la proteina Histone cluster 1 H1E, una variante dell’istone H1 “linker” che si lega al DNA nucleosomico e stabilizza la struttura della cromatina di ordine superiore. Modulando la spaziatura dei nucleosomi e la compattazione della cromatina, H1E influenza l’accessibilità del genoma per trascrizione, replicazione e riparazione del DNA, contribuendo alla regolazione epigenetica e alle dinamiche della cromatina accoppiate al ciclo cellulare. Alterazioni nella composizione o nel dosaggio degli istoni H1 possono perturbare i programmi globali di espressione genica e l’integrità della cromatina, rendendo HIST1H1E un bersaglio rilevante negli studi sulla regolazione dello sviluppo, la stabilità del genoma e il rimodellamento della cromatina associato alle malattie. Poiché le varianti di H1 possono influenzare reti trascrizionali specifiche di linea cellulare, HIST1H1E viene spesso esaminato in contesti quali differenziamento, risposte allo stress e disregolazione trascrizionale.
Histone cluster 1 H1E Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HIST1H1E nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HIST1H1E. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HIST1H1E. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HIST1H1E interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.