Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HERG Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401143-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HERGO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HERG (h) e o Plasmídeo Double Nickase HERG (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KCNH2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HERG Anticorpo (F-12): sc-377388
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HERG Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401143-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HERG Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401143-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KCNH2 codifica o canal de potássio humano HERG (Kv11.1), dependente de voltagem, que conduz a corrente retificadora tardia rápida (IKr), um dos principais determinantes da repolarização do potencial de ação cardíaco e da duração do intervalo QT. A atividade do canal HERG integra-se às vias de excitabilidade e homeostase iônica ao moldar a dinâmica do potencial de membrana e o timing do período refratário. Alterações genéticas ou funcionais em KCNH2 estão associadas a fenótipos de QT longo hereditários e adquiridos e à suscetibilidade a arritmias ventriculares, e o canal é um alvo fora do alvo (“off-target”) frequente e crítico em estudos de eletrofisiologia e farmacologia de segurança. Além dos cardiomiócitos, a expressão de KCNH2 em contextos de células excitáveis e proliferativas sustenta pesquisas sobre tráfego do canal, regulação do gating e crosstalk entre membrana e sinalização.
HERG O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KCNH2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KCNH2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KCNH2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KCNH2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.