Hemoglobin α1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420800
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Hemoglobin α1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Hemoglobin α1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Hemoglobin α1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420800 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Hba-a1 codifica a subunidade α1 da hemoglobina do camundongo, um componente central do tetrâmero de hemoglobina adulta que se liga ao heme e permite o transporte reversível de oxigênio nos eritrócitos. Sua expressão é rigidamente coordenada durante a eritropoiese com os genes da β-globina e com enzimas da biossíntese do heme, conectando o Hba-a1 à regulação dos genes de globina, ao manejo do ferro e à maturação das hemácias. A desregulação da dosagem de α-globina compromete a montagem da hemoglobina e o equilíbrio redox, favorecendo eritropoiese ineficaz e fenótipos de estresse hemolítico que modelam características da α-talassemia e de anemias relacionadas. Por ser um gene altamente expresso e restrito a uma linhagem celular, o Hba-a1 é comumente utilizado para investigar a arquitetura regulatória do locus da α-globina e os mecanismos que governam a diferenciação eritroide.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Hemoglobin α1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Hba-a1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Hba-a1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Hba-a1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Hemoglobin α1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Hba-a1 para a investigação da sinalização de Hemoglobin α1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Hba-a1 críticos para a função Hemoglobin α1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Hba-a1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Hemoglobin α1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Hemoglobin α1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Hba-a1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Hemoglobin α1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Hemoglobin α1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Hba-a1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Hba-a1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.