HBXIP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405228-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HBXIPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HBXIP (h) e o Plasmídeo Double Nickase HBXIP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LAMTOR5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HBXIP Anticorpo (H-5): sc-373980
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HBXIP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405228-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HBXIP Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405228-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LAMTOR5 codifica o HBXIP, um componente do complexo Ragulator em endossomos tardios/lisossomos que sustenta a ativação do mTORC1 dependente de aminoácidos e coordena a deteção de nutrientes com o crescimento celular e o metabolismo. O HBXIP também participa no tráfego endossomal e foi descrito como modulador de processos associados à transcrição e ao ciclo celular por meio de interações proteína–proteína. Por meio dessas funções, LAMTOR5/HBXIP liga a sinalização lisossomal a programas proliferativos e metabólicos, tornando-se relevante para estudos de sinalização oncogénica, adaptação ao stresse e utilização alterada de nutrientes observada em múltiplos contextos de doença. O seu envolvimento em redes relacionadas com o mTOR também o conecta à regulação da autofagia e à dinâmica de sinalização associada aos lisossomos.
HBXIP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LAMTOR5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LAMTOR5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LAMTOR5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LAMTOR5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.