Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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hamartin Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-425739-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- hamartinO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase hamartin (m) e o Plasmídeo Double Nickase hamartin (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Tsc1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:hamartin Anticorpo (C-8): sc-377386
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
hamartin Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-425739-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
hamartin Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-425739-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **Tsc1** do camundongo codifica a **hamartina**, uma proteína de ancoragem (scaffold) que forma um complexo funcional com a **TSC2** (tuberina) e atua como um importante regulador negativo da sinalização **mTORC1**. Por meio de sua atividade de **GAP** sobre **Rheb** quando em parceria com a TSC2, o complexo TSC1/TSC2 integra sinais das vias **PI3K–AKT**, **AMPK** e de condições de energia ou estresse celular para conter programas anabólicos de crescimento, a tradução e a autofagia. A perda da função da hamartina desorganiza o controle homeostático do tamanho celular e do metabolismo e está fortemente associada à biologia do **complexo de esclerose tuberosa**, incluindo fenótipos proliferativos aberrantes e alterações do neurodesenvolvimento em modelos experimentais. Assim, **Tsc1** é amplamente utilizado em estudos de detecção de nutrientes, proteostase, função sináptica e vias supressoras de tumor.
hamartin O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Tsc1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Tsc1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Tsc1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Tsc1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.